由原作动画“真选组暗杀篇”为主线剧情，并另外搭配短篇搞笑日常组成。 真选组副长土方十四郎在护卫将军的过程中，遭遇浪士偷袭，脖子被植入芯片，以至于行为御宅化，对于二次元事物无法抗拒，洽逢真选组参谋—伊东鸭太郎归队，野心勃勃的伊东策划排挤土方，并与鬼兵队联手，企图在列车上暗杀组长近藤勋。 土方在意识清醒时委托万事屋保护真选组，阿银一行人也因此意外卷入事件，并在过程中意外发现鬼兵队河上万斋等人的真正阴谋…